ПЦР инфекции

ПЦР – один из основных методов диагностики инфекционных заболеваний. Он основан на обнаружении генетического материала возбудителя в исследуемом материале. Суть его заключается в поиске определенного фрагмента ДНК, соответствующего образцу, с его многократным копированием. Оно осуществляется посредством повторных циклов репликации (удвоение) и денатурации (разделения нитей) ДНК. Метод был открыт в 1983 году. За это Кэри Мюллис получил Нобелевскую премию.

ПЦР считается одним из самых выдающихся открытий в области молекулярной биологии. Сегодня реакция амплификации нуклеиновых кислот находит самое широкое применение во всех областях медицины.

С помощью этого анализа можно обнаружить любые инфекции:

• вирусные;
• бактериальные;
• протозойные;
• грибковые.

Благодаря этому методу врачи проводят идентификацию возбудителей кишечных, половых, респираторных и любых других инфекций.

Существуют качественные и количественные анализы. Качественные позволяют установить факт пребывания возбудителя в организме человека.

Диагностика дает ответ на вопрос, присутствует ли микроорганизм в исследуемом материале. Данный метод исследования более простой и доступный по цене. Он используется для выявления однозначно патогенных микроорганизмов у мужчин и женщин. Например, для диагностики хламидиоза, гонореи или трихомониаза.

В иных случаях установления факта наличия возбудителя недостаточно для установления диагноза. Потому что многие микроорганизмы являются условно-патогенными. Они способны вызывать воспалительные процессы только в случае чрезмерного роста. Примером может служить уреаплазма или кандида. В таком случае целесообразно проводить количественное исследование ПЦР. Данный вид исследования позволяет определить количество копий ДНК в единице объема биоматериала. Кроме того, количественное исследование может потребоваться при неизлечимых вирусных заболеваниях. Это необходимо для контроля уровня виремии или вирусной нагрузки. В таком случае ПЦР позволяет оценить прогноз заболевания, определить оптимальную терапевтическую тактику и оценить эффективность проводимого лечения.

Преимущества ПЦР:

• Прямое определение возбудителей заболеваний.

При некоторых исследования инфекции, передаваемые пол путем, определяются только по косвенным признакам. Например, по наличию антител в организме к этим возбудителям. Но ПЦР направлена на обнаружение самого микроорганизма, а не признаков его пребывания в организме.

• Высокая специфичность.

В ходе исследования определяется фрагмент ДНК возбудителя. Последовательность нуклеотидов в цепочке ДНК уникальна для каждого микроорганизма. Поэтому ложноположительные реакции – большая редкость. Они наблюдаются разве что в случае неправильного хранения и получения клинического материала, когда в него попадают возбудители из организма другого человека. Если же материал собран правильно, комплекс ПЦР позволяет выявить именно тех возбудителей, на которые проводится исследование.

• Высокая чувствительность.

Благодаря ПЦР скрытые инфекции могут быть диагностированы на ранней стадии, когда нет никаких симптомов. Потому что для обнаружения возбудителя достаточно лишь несколько копий ДНК в пробе.

• Высокая скорость проведения теста.

Результатов ПЦР не нужно ждать неделями. Диагностика занимает 4-6 часов. Это позволяет в случае необходимости проводить срочные исследования. Например, если пациент пребывает в тяжелом состоянии и ему нужно незамедлительно установить диагноз и назначить целенаправленное этиотропное лечение.

• Возможность использования любого клинического материала.

ПЦР позволяет исследовать что угодно. Это может быть слизь, эякулят, смывы бронхов, кровь и т.д.

ПЦР дает возможность найти возбудителя везде, где он может быть.

Недостатки ПЦР:

• Невозможно выявление инфекции, возбудитель которой не выделяется во внешнюю среду.

В некоторые фазы заболевания микроорганизмы могут не выделяться во внешнюю среду. В таком случае получение биологического материала, который мог бы быть исследован, становится невозможным. В таких ситуациях более предпочтительными остаются серологические методы исследования, которые выявляют антитела в крови к возбудителю. Они продуцируются иммунной системой, независимо от того, где находится микроорганизм.

• Необходимость тщательного соблюдения правил взятия, сохранения и транспортировки клинического материала.

Высокая чувствительность имеет и обратную сторону. При нарушении техники взятия или хранения клинического материала возможна его контаминация микроорганизмами из внешней среды или организма другого человека. Около 70% ошибочных результатов связаны с загрязнением биоматериала.

• Выявление ДНК не говорит однозначно о связи выделенного микроорганизма с патологическим процессом.

Вполне вероятно, что будет обнаружен генетический материал уже уничтоженного антибиотиками возбудителя. В таком случае нельзя наверняка утверждать, было ли лечение успешным или требуется повторный курс терапии.

В целом, недостатков у ПЦР не так много, и они несущественны. Поэтому этот метод лабораторной диагностики остается самым востребованным и часто используемым в гинекологии, венерологии, инфектологии и ряде других медицинских отраслей. В процессе диагностики может быть обнаружена только та инфекция, поиск которой ведется. Например, при исследовании на трихомониаз можно выявить только трихомонаду, и больше ничего. Даже если в организме присутствует дополнительно хламидия и гонококк, они не могут быть обнаружены случайно. Только путем проведения целенаправленной диагностики на эти инфекции их можно выявить. Потому что в ходе исследования проводятся сравнение с эталонной ДНК. То есть, берется последовательность нуклеотидов, характерная для генетического материала трихомонады. С ней сравнивается ДНК из клинического материала. Они либо совпадают, либо нет. Поэтому при первичной диагностике инфекционных заболеваний диагностика часто проводится не на один, а на несколько возбудителей.

Часто применяются комплексы анализов. Какие входят в них возбудители и сколько их, зависит от клинической ситуации. Врач может определять список индивидуально, исходя из симптомов и данных анамнеза. Кроме того, многие лаборатории предлагают стандартные комплексы на урогенитальные инфекции (ИППП) или другие группы заболеваний. Они могут включать исследование методом ПЦР на 10, 12, 13, 15 и больше инфекций.

ПЦР анализ на инфекции

Часто пациенты спрашивают, когда лучше сдать анализ ПЦР и сколько делается это исследование. Сдавать анализ стоит не раньше, чем через 2 недели после предполагаемой даты инфицирования, если речь идет о половых инфекциях. Потому что в более ранние сроки возбудитель практически не выделяется во внешнюю среду. Поэтому лучше подождать, чтобы избежать ложноотрицательных анализов. Что касается сроков – обычно результаты человек получает на следующий день. При необходимости возможна срочная диагностика. В таком случае результаты можно получить уже через 4-5 часов.

Клинический материал берут у пациента разный. Методом ПЦР можно проводить диагностику инфекций по:

• крови
• моче
• в мазке
• анализ кала и т.д.

В крови часто определяют вирусные инфекции, таких как герпес, ВИЧ, гепатиты. Специфические половые инфекции обычно выявляются в мазке, моче, эякуляте, секрете предстательной железы. Возбудителей кишечных инфекций ищут в кале, респираторных – в мокроте.

К исследованию нужно подготовиться, чтобы получить правильные результаты. Если вы сдаете анализ методом ПЦР на половые инфекции, то нужно:

• за 48 часов до сдачи клинического материала избегать любых половых контактов, даже с использованием презерватива;
• женщинам в это же время следует избегать любых исследований или лечебных процедур, связанных с введением предметов во влагалище (трансвагинальное УЗИ, гинекологическое обследование, использование тампонов и т.д.);
• анализы стоит сдавать до начала антибиотикотерапии, иначе можно получить ложноотрицательные результаты;
• непосредственно перед сдачей мазков из уретры следует воздержаться от мочеиспускания в течение 3 часов, чтобы моча не смыла микроорганизмы.

После сдачи клинического материала он помещается в транспортную среду и отправляется в лабораторию. При следующем визите к врачу результаты анализа обсуждаются с пациентом и назначается в случае необходимости лечение.

Список

Анализ на ПЦР обычно сдают сразу на несколько возбудителей. В зависимости от ситуации, это могут быть исследования на ИППП или респираторные вирусные инфекции. Возможно проведение исследования на кишечные инфекции. В такой комплекс может входить 20-24 возбудителей. В их числе:

• несколько видов шигелл;
• несколько разновидностей сальмонелл, включая возбудителя брюшного тифа;
• анализ на кишечную палочку;
• кампилобактерии;
• клостридии;
• иерсинии.

Часто сдаются комплексы на половые инфекции. Потому что почти все они проявляются одинаковыми симптомами. И определить по клинической картине, какой возбудитель вызвал признаки уретрита, достоверно невозможно. К тому же, в 60% случаев у пациентов с жалобами на воспаление органов мочеполовой системы обнаруживается 2 и более возбудителя. Поэтому им требуется комплексное обследование.

Многие сдают ПЦР на ИППП с профилактической целью. Например, в случае недавней смены партнера.

Люди также обследуются с определенной периодичностью, если они ведут активную половую жизнь. Ведь в этом случае риск заразиться инфекциями достаточно высокий.

Лаборатории предлагают таким пациентам обследование на 8-16 инфекций. В минимальный список входят наиболее часто встречаемые заболевания. Но список может быть и расширенным. На 8 инфекций обычно сдают анализы на:

• сифилитическую инфекцию;
• ВИЧ;
• гепатиты В и С;
• хламидии;
• трихомонады;
• микоплазмы;
• гонококки.

Дополнительно комплекс может включать:

• ВИЧ;
• гарднереллез;
• герпес 1 и 2 типа;
• 2 или 4 типа HPV (папилломавирусная инфекция);
• уреаплазма;
• кандида.

По показаниям может проводиться углубленное исследование. Например, в случае признаков кандидоза проводится определение в клиническом материале ДНК нескольких видов этих грибков.

Чаще всего патологию вызывает кандида альбиканс. Но в 20% клинических случаев возбудителем является другой вид кандид. Поэтому возможно проведение ПЦР исследования на 5-6 видов грибов. Кроме того, наличие кондилом и диспластических изменений шейки матки может стать показанием для обследования на папилломавирусную инфекцию. Обычно анализы сдают на 2 наиболее часто встречаемых типа ВПЧ и 2 онкогенных типа. Но некоторым пациентам назначается полная диагностика на 9-10 или даже на 21 тип папилломавируса. Такое обследование позволяет дать прогноз развитию заболевания, оценить риск рака шейки матки и принять необходимые лечебные меры, направленные на предотвращение онкологических процессов.

Сдать анализы на половые или любые другие инфекции методом ПЦР можно в нашей клинике. Затем вы можете получить консультацию врача, который проведет развернутую расшифровку результатов исследования.

Наши преимущества:

• безболезненное взятие мазков;
• при необходимости сохранение вашей анонимности;
• достоверные результаты исследований благодаря сотрудничеству с лучшими лабораториями Москвы;
• высокая квалификация врачей, которые правильно интерпретируют полученные данные и в случае необходимости назначат качественное лечение;
• хорошая организация работы и отсутствие очередей (запись на прием проводится на определенное время).

В нашей клинике вас ждет доброжелательное отношение и качественное медицинское обслуживание.